Медицина и здравоохранение сегодня

Диагностика дирофиляриоза

Учебные материалы / Дирофиляриоз плотоядных / Диагностика / Диагностика дирофиляриоза

Страница 2

· Исследование крови для обнаружения микрофилярий может быть облегчено добавлением вещества, вызывающего гемолиз. При этом методе периферическую кровь собак исследуют сразу после взятия (на месте). Каплю крови помещают на предметное стекло, добавляют две капли дистиллированной воды или 1%-ного водного раствора уксусной кислоты, накрывают покровным и исследуют под малым увеличением микроскопа.

· При использовании метода с применением уксусной кислоты к 1 мл венозной крови сразу же приливают 5 мл 2%-ного раствора уксусной кислоты. Смесь центрифугируют при 1000 об/мин. В течение 3-5 минут. Надосадочную жидкость выливают, а осадок микроскопируют для обнаружения микрофилярий. При этом методе личинки погибают, и их бывает трудно обнаружить в исследуемом материале.

· Метод Руже-Мюленса - к крови добавляют пятикратный объем раствора: 5%-ный формалина 95 мл, уксусной кислоты 5 мл и концентрированного спиртового раствора генцианвиолета 2 мл. Смесь центрифугируется, надосадочная жидкость сливается, а осадок опять центрифугируют с водой и смотрят под микроскопом. Этот метод можно упростить: каплю крови помещают в пробирку с раствором и микроскопируют на следующий день.

· Метод Шуффнера - 10 капель крови помещают в 10 мл физиологического раствора, к которому предварительно добавили несколько капель раствора сапонина. После гемолиза, производят центрифугирование. Живые, подвижные личинки обнаруживаются в осадке.

· Модифицированный метод Кнотта дает хорошие результаты при практической постановке диагноза на наличие микрофилярий у собак, Метод заключается в следующем: к 1 мл венозной крови добавляют 10 мл 2%-ного раствора формалина. Этот раствор хорошо перемешивают и центрифугируют при 1500 об/мин. в течение 5 минут. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок смешивают с равным объемом метиленового синего в разведении 1:1000 и оставляют для окрашивания на 5 минут. Окрашенный осадок микроскопируют для обнаружения фиксированных микрофилярий.

К дополнительным методам исследования относятся следующие:

. Морфологические и биохимические исследования крови - не позволяют поставить точный диагноз на дирофиляриоз, но помогают определить патологические изменения в органах и тканях, которые могут быть связаны с дирофиляриозом. Наиболее часто при дирофиляриозе отмечают нормоцитарную, нормохромную или гипохромную анемию (гематокрит <20-30%), гемолитическую анемию, нейтрофилию, эозинофилию (85% случаев), базофилию (60% случаев), моноцитоз, тромбоцитопению. В тяжелых случаях, особенно если присутствует сердечная недостаточность, повышается активность АлАТ и Ac AT, иногда отмечается гипербилирубинемия. Азотемия может быть внепочечного происхождения, если присутствуют дегидратация или порок сердца, или может быть вторична при гломерулонефрите. Гломерулонефрит может усложнять клиническую картину.

2. При исследовании мочи редко выявляют изостенурию, чаще наблюдается альбуминурия.

3. Рентгенография грудной полости - хотя и не является хорошим методом обнаружения дирофилярий, но позволяет косвенно определить степень инвазии по оценке легочных паренхиматозных изменений. Рентгенографические изменения, которые развиваются на ранних стадиях болезни (кардиомегалия правого желудочка, расширение легочных артерий, отчетливая демаркация легочных сосудов и периваскулярных уплотнений, особенно в каудальных долях), присутствуют в 85% случаев. Рентгенографические изменения включают увеличение правого желудочка (60% случаев), расширение легочной артерии и увеличение рентгенографической плотности легочных артерий (50%), а также извитость легочной артерии (50%). Если при этом имеет место сердечная недостаточность, то отмечается увеличение синуса полых вен, печени и селезенки, а также наблюдается плевральный выпот или асцит.

4. Эхокардиография - при высокой зараженности, когда гельминты локализуются в легочных артериях, правом желудочке и правом предсердии наблюдают: гипертрофию или расширение правого желудочка, перикардиальный выпот, парадоксальную подвижность перегородки, сплющивание и утолщение перегородки, недостаточность трехстворчатого клапана, повышение давления в легочных артериях. Электрокардиография - выявляет синусовую аритмию (тахикардию), признаки расширения правого желудочка и правого предсердия, нарушение проводимости.

5. Метод непрямой иммунофлюоресценции (МНИФ, IFA) используется для обнаружения антител к микрофиляриям и имеет специфическую полноценность при диагностике истинного дирофиляриоза, а так же тех случаев, когда личинки отсутствуют из-за иммунного разрушения. При помощи иммуноферментного анализа (ИФА, ELISA) можно обнаружить антитела к дирофиляриям или сам антиген. МНИФ и ИФА разработаны за рубежом, где получили широкое распространение благодаря их точности, чувствительности, специфичности и быстроте диагностики. После успешной терапии дирофиляриоза методы ИФА (1 год) и МНИФ (6 месяцев) дают положительный результат при определении антител.